swant 300說(shuō)明書

產(chǎn)品名稱：鈣結(jié)合蛋白D28K小鼠單克隆抗

英文名稱：Monoclonal anti Calbindin D-28k

貨號(hào)： 300

批號(hào)：07 (F)

外觀：凍干粉.

      溶解：200 µl / 500 µl 或 1 ml 雙蒸水

規(guī)格：

產(chǎn)品描述：

鈣結(jié)合蛋白 D-28k單克隆抗體是將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與來(lái)自腸道[1]的鈣結(jié)合蛋白-28k免疫小鼠脾細(xì)胞雜交產(chǎn)生的小鼠IgG1。鈣結(jié)合蛋白D-28k的單克隆抗體（McAB），是EF-hand家族與鈣調(diào)素和肌鈣蛋白C相關(guān)的鈣結(jié)合蛋白。

反應(yīng)種屬：

WB：人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞。

經(jīng)WB免疫印跡驗(yàn)證McAB 300（鈣結(jié)合蛋白 D-28k）能測(cè)除魚以為的人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞的組織提取物（見(jiàn)圖1）。并且不與鈣網(wǎng)膜蛋白及其他鈣結(jié)合蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng)。凝膠電泳顯示McAB 300（鈣結(jié)合蛋白 D-28k）特異性結(jié)合位點(diǎn)為D-28k（MW 28'000，IEP 4.8）。放射免疫法檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白D-28k，靈敏度為10ng/反應(yīng)，親和力為1.6x 10¹² L/M。

經(jīng)測(cè)試應(yīng)用：

WB, IHC-P/Fc, IF-P/Fc，ELISA，RIA

WB： 免疫印跡； IHC ：免疫組織化學(xué)；IF：免疫熒光，ELISA：酶聯(lián)免疫；RIA：放射免疫

以下方法廠家已用于驗(yàn)證抗體的特異性和效價(jià)評(píng)價(jià)：（a）免疫組化/免疫熒光（HRP或生物素-親和素標(biāo)記法檢測(cè)4%多聚甲醛固定的冰凍組織切片/石蠟組織切片；（b）免疫印跡WB/ELISA；（c）放射免疫分析。

稀釋比例

免疫組化： 1:5'000 - 1:10'000 生物素標(biāo)記法。

WB： 1:100 - 1:1'000 （HRP）。

建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容選擇合適的方法。

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儲(chǔ)存：

短期保存：- 20°C，長(zhǎng)期保存：- 80°C，近期頻繁使用保存于 4°C (增加0.01% 疊氮鈉)。避免反復(fù)凍融。建議分裝小份儲(chǔ)存。

特異性表達(dá)：

免疫組織化學(xué)染色表明鈣結(jié)合蛋白 D-28k特異表達(dá)在所有脊椎動(dòng)物（魚類除外）的腦、腎和胰腺的組織切片（漂片/貼片法）

腦組織提取物WB 檢測(cè)

1 2 3 4 5 6 7

28 Kda

圖1 ：不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測(cè)結(jié)果。上樣順序依次為：1 小鼠；2 大鼠；3 豚鼠；4 兔子；5 食蟹猴；6 斑馬魚；7 重組鈣結(jié)合蛋白D-28k。WB結(jié)果表明，在所有物種中（斑馬魚除外），僅特異檢測(cè)到28kDa的條帶。

鈣結(jié)合蛋白D-28k基因敲除小鼠的免疫組織化學(xué)（IHC）研究

CB300（鈣結(jié)合蛋白 D-28k）于正常腦組織的神經(jīng)元高表達(dá)（圖2a）而在鈣結(jié)合蛋白D-28k基因敲除小鼠腦組織的相同區(qū)域未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)（圖2b）。

參考文獻(xiàn)

1. Celio M.R. et al., Cell Calcium 11:599-602, 1990
2. Kretsinger R.H. (1981) Neurosci. Res. Progr. Bull. 19/8, MIT-Press
3. Garcia-Segura L.M. et al. (1984) Brain Rews. 296: 75-86.
4.  Airaksinen M.S., et al, (1997), PNAS 94(4) : 1488-1493