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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章Ludger Tag聚糖的全甲基化

Ludger Tag聚糖的全甲基化

更新時(shí)間:2021-11-23點(diǎn)擊次數(shù):2413


Ludger Tag 聚糖的全甲基化

MALDI-MS 分析聚糖可提供質(zhì)量組成數(shù)據(jù),并且比 UHPLC 技術(shù)更快(平均一個(gè)樣品只需 1 分鐘的數(shù)據(jù)采集時(shí)間),但唾液酸化聚糖通常更難分析,因?yàn)橥僖核岵糠植环€(wěn)定. 全甲基化是用于 MALDI-MS 檢測(cè)的碳水化合物衍生化的流行技術(shù),因?yàn)樗岣吡穗婋x效率,穩(wěn)定了唾液酸并有助于連鎖分析研究。然而,用于全甲基化的傳統(tǒng)技術(shù)速度慢、勞動(dòng)強(qiáng)度大,因此不適合高通量樣品分析。

我們開發(fā)了一種簡(jiǎn)單易用的 LudgerTag 試劑盒,用于全甲基化聚糖,LT-PERMET-VP96。該套件可用于使用手動(dòng)方法或適用于液體處理機(jī)器人的自動(dòng)方法處理 1-96 個(gè)樣品。它適用于 N-或 O-聚糖,一旦全甲基化,它們可以通過 MALDI-TOF-MS 或 LC-MS 進(jìn)行分析。

我們已經(jīng)驗(yàn)證了這項(xiàng)技術(shù),并證明糖譜分析數(shù)據(jù)是可靠的,可與金標(biāo)準(zhǔn) HILIC UHPLC 方法相媲美。該技術(shù)已用于 Ludger 的一系列高通量研究(使用自動(dòng)全甲基化樣品制備時(shí)間低于 5.5 小時(shí),可處理 96 個(gè)樣品)。

聚糖標(biāo)準(zhǔn)品

Ludger 擁有一系列適用于不同應(yīng)用的系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)、過程控制和參考標(biāo)準(zhǔn),包括唾液酸、單糖、聚糖分析和表征的分析。我們提供各種未標(biāo)記的 N-聚糖 (N)、O-聚糖 (O)、寡糖、糖蛋白/糖肽和聚糖文庫標(biāo)準(zhǔn)品。此外,我們的標(biāo)準(zhǔn)品目錄還包括用 2-氨基苯甲酰胺 (2-AB)、2-AA(2-氨基苯甲酸)、普魯卡因酰胺、8-氨基芘-1,3 熒光標(biāo)記的各種 N- 和 O- 聚糖標(biāo)準(zhǔn)品,6-三磺酸 (APTS) 和全甲基化聚糖標(biāo)準(zhǔn)品。我們還提供 Ludger BioQuant 品牌下的定量聚糖和糖肽標(biāo)準(zhǔn)品。

精心設(shè)計(jì)的分析策略的一個(gè)關(guān)鍵組成部分是包含標(biāo)準(zhǔn)。下面的標(biāo)準(zhǔn)品表顯示了哪些標(biāo)準(zhǔn)品可用于唾液酸、單糖、N-聚糖和/或 O-聚糖分析過程中的最佳實(shí)踐。
這些分為以下幾類;

  1. 系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)使分析人員能夠測(cè)試分析系統(tǒng)(例如色譜、質(zhì)譜和/或 CE)的整體功能并評(píng)估其是否適合其預(yù)期用途。


  2. 流程標(biāo)準(zhǔn)或流程控制用于驗(yàn)證部分或整個(gè)流程是否正常運(yùn)行。糖分析中的過程標(biāo)準(zhǔn)有四個(gè)主要類別:釋放、標(biāo)記、釋放后標(biāo)記和外切糖苷酶測(cè)序


  3. 參考標(biāo)準(zhǔn)允許通過比較來表征。這可以通過將未知物的色譜或電泳保留時(shí)間與結(jié)構(gòu)已*表征的標(biāo)準(zhǔn)物的色譜或電泳保留時(shí)間直接比較來實(shí)現(xiàn)。此外,未知結(jié)構(gòu)的主要分配可以通過將它們的 GU(葡萄糖單位)值(使用葡萄糖均聚物 (GHP) 標(biāo)準(zhǔn)獲得)與 GU 值在數(shù)據(jù)庫或文獻(xiàn)中的聚糖進(jìn)行比較來完成。


  4. 定量聚糖標(biāo)準(zhǔn)品用于確定樣品中分析物的絕對(duì)量。它們還可用于量化流程的效率。


  • N-聚糖命名表


可用的 N-聚糖存在于大多數(shù)生物和生物制藥糖蛋白中,可分為以下幾類:低聚甘露糖,以及巖藻糖基化、唾液酸化和二、三和四天線的復(fù)合聚糖。聚糖可作為具有游離還原末端(醛醇)或化學(xué)衍生的分子獲得。N-聚糖的常見化學(xué)衍生物是熒光標(biāo)記的糖苷(2-AA、2-AB、APTS、普魯卡因酰胺等)或全甲基化聚糖。

天然聚糖通常適用于使用帶有熒光標(biāo)簽的還原胺化或進(jìn)行全甲基化或乙基酯化等衍生化的標(biāo)記方法的過程控制。


A4 家族聚糖


NA4 聚糖 (A4G4)

CN-NA4-10U(大小:10μg)和-20U(大?。?0μg)

含有末端半乳糖殘基的四觸角 N-聚糖。
m/z:2370.8566

產(chǎn)品指南




NGA4 聚糖 (A4)

CN-NGA4-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的四觸角 N-聚糖。
m/z:1722.6453

產(chǎn)品指南



A3 家族聚糖


A3 聚糖 (A3G3S3)

CN-A3-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有末端唾液酸殘基的三天線 N-聚糖。
m/z:2879.0106

產(chǎn)品指南


NA3 聚糖 (A3G3)

CN-NA3-10U(大小:10μg)和-20U(大?。?0μg)

含有末端半乳糖殘基的三角 N-聚糖。
m/z:2005.7244

產(chǎn)品指南


NGA3 聚糖 (A3)

CN-NGA3-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的三觸角 N-聚糖。
m/z:1519.5659

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A2F 家族聚糖


A2F 聚糖(FA2G2S2、G2FS2)

CN-A2F-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

雙天線 N-聚糖,包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z:2368.8409

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A1F 聚糖 (FA2G2S1, G2FS1)

CN-A1F-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z:2077.7455

產(chǎn)品指南


NA2F 聚糖(FA2G2、G2F)

CN-NA2F-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

雙天線 N-聚糖,包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z:1786.6501

產(chǎn)品指南


NGA2F 聚糖 (FA2, G0F)

CN-NGA2F-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

雙天線 N-聚糖,包含末端 N-乙酰氨基葡糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z:1462.5444

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FA2G1 聚糖 (G1F)

CN-FA2G1-10U(大小:10μg)和-20U(大?。?0μg)

含有一個(gè)末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化的雙觸角 N-聚糖。
m/z:1624.5973

產(chǎn)品指南



A2 家族聚糖


A2 聚糖(A2G2S2、G2S2)

CN-A2-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z:2222.7830

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A1 聚糖(A2G2S1、G2S1)

CN-A1-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

含有一個(gè)末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z:1931.6876

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A2G1 聚糖 (G1)

CN-A2G1-20U(大小:20μg)

含有一個(gè)末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z:1478.5393

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NA2 聚糖 (A2G2, G2)

CN-NA2-10U(大?。?0μg)和-20U(大?。?0μg)

含有末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z:1640.5922

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NGA2 聚糖 (A2, G0)

CN-NGA2-10U(尺寸:10µg)和-20U(尺寸:20µg)

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z:1316.4865

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低聚甘露糖聚糖


Man-9 聚糖

CN-MAN9-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 9 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:1882.0634

產(chǎn)品指南


Man-8 聚糖

CN-MAN8-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 8 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:1720.5919

產(chǎn)品指南


Man-7 聚糖

CN-MAN7-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 7 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:1558.5391

產(chǎn)品指南


Man-6 聚糖

CN-MAN6-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 6 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:1396.4863

產(chǎn)品指南


Man-5 聚糖

CN-MAN5-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 5 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:1234.4334

產(chǎn)品指南


M3N2 聚糖 (Man-3)

CN-M3N2-10U(尺寸:10μg)和-20U(尺寸:20μg)

具有 3 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z:910.3278




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