S-腺苷蛋氨酸
S-腺苷甲硫氨酸（也稱為 SAM、SAMe 或 AdoMet）在所有類型生物體的甲基化生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在甲基化循環(huán)中，SAM 充當(dāng)甲基的供體，用于 DNA 和蛋白質(zhì)的共價(jià)修飾。SAM 水平的變化與衰老過(guò)程、許多神經(jīng)和精神疾病有關(guān)，包括阿爾茨海默病、抑郁癥、HIV 相關(guān)的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛和還有慢性肝功能不全、動(dòng)脈硬化和癌癥。目前，SAM 使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進(jìn)行量化。HPLC 耗時(shí)、昂貴，而且由于需要大量的有機(jī)溶劑，

Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸熒光 (SAM) 檢測(cè)1,2
Mediomics Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 熒光檢測(cè)方法基于成熟的熒光測(cè)量技術(shù)和我們獲得新型檢測(cè)平臺(tái)設(shè)計(jì)的結(jié)合它利用 DNA 結(jié)合蛋白作為它們各自的小分子共調(diào)節(jié)因子（配體）的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋白對(duì)其DNA 結(jié)合位點(diǎn)的親和力在其配體 S-腺苷甲硫氨酸的存在下大大增加。對(duì)于該測(cè)定，MetJ 共有序列被分成兩個(gè) DNA“半位點(diǎn)"。一半片段用熒光素標(biāo)記，另一半片段用 Oyster ®  645 熒光團(tuán)標(biāo)記3,4。測(cè)試樣品中 SAM 的相對(duì)量將影響測(cè)定中 DNA-MetJ 蛋白復(fù)合物形成的量。當(dāng)這種復(fù)合物形成時(shí)，它會(huì)使熒光標(biāo)記的 DNA 半位點(diǎn)靠近并導(dǎo)致熒光信號(hào)發(fā)射發(fā)生可測(cè)量的變化（增加），這可以使用酶標(biāo)儀輕松測(cè)量（波長(zhǎng)設(shè)置：吸收 485 nm；發(fā)射 665 nm ）。然后使用 SAM 標(biāo)準(zhǔn)曲線確定測(cè)試樣品中的 SAM 濃度。Bridge-It ® SAM 熒光檢測(cè)方法表現(xiàn)出非常理想的性能特征，包括高 (>6:1) 信號(hào)與背景 (S/B) 比、寬檢測(cè)范圍 (~0.4 µM – 100 µM) 以及 0.4 µM 的檢測(cè)靈敏度。該檢測(cè)水平 (0.4 µM) 可用于量化大多數(shù)感興趣的測(cè)試樣品中的 SAM，包括生物體液、細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細(xì)胞的提取物。

與 HPLC 程序相比，Bridge-It ®  SAM 熒光檢測(cè)方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此，它非常適合在大量測(cè)試樣品中快速、同時(shí)測(cè)量 SAM 水平。此外，這種方法很容易適應(yīng)目前用于藥物發(fā)現(xiàn)研究的高通量篩選平臺(tái)。