膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原 成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。 膠原酶僅對細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為zui終 濃度200U/ml(約為1mg/mL)或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型(見下表)。Worthington的膠原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型及色譜純化的膠原酶(CLSPA)常被研究人員用于細(xì)胞，組織的分離等操作，后者(CLSPA型)常與輔助酶，如彈性蛋白酶，透明質(zhì)酸等混合使用來獲得更佳的效果，但混合使用要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的對象和各項(xiàng)參數(shù)做zui適的調(diào)和。Worthington也為您提供了相應(yīng)的指南，請參閱 Collagenase Sampling Program，和Tissue Dissociation Guide。